摘要：本文系統的介紹了運用立式高壓滅菌鍋對培養基滅菌的使用方法以及注意事項。高壓滅菌鍋作為實驗室中必不可少的儀器之一，在培養基的滅菌方面具有不可代替的作用。此外，在廢物處理方面，凡含有病原微生物的廢物必須經過滅菌才能作為普通廢物處理。特別是對操作中可能產生的迸濺或泄漏必須進行消毒,從而達到對病原微生物的殺滅,對操作人員、對環境進行保護的目的。
 
關鍵字：高壓滅菌鍋  滅菌 培養基  使用  注意事項
 
介紹
    高壓蒸氣滅菌鍋是目前應用**廣泛、滅菌效果**好的滅菌器具之一，其種類有手提式、直立式、橫臥式等。它們的構造及滅菌原理基本相同。高壓蒸汽滅菌鍋屬于高壓蒸汽滅菌器之一，它具有耐高溫、高壓、不怕潮濕等優點。此外，由于高壓滅菌鍋具有造型新穎美觀、結構合理、功能齊全、加熱迅速、滅菌徹底等優點，因此它廣泛適用于醫療、科研、食品、等單位對手術器械、敷料、玻璃器皿、橡膠制品、食品、藥液、培養基等物品進行滅菌，成為滅菌的得力助手。
 
結構
   立式高壓蒸汽滅菌鍋是一個密閉的耐高溫和耐高壓的雙層金屬圓筒，兩層之間盛有水。內外皆有金屬制成。
   1.外鍋：供裝水產生蒸汽之用。堅厚，其上方或前方有金屬厚蓋，蓋有螺栓，借以緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢。加熱后，滅菌器內蒸汽壓力升高，溫度也隨之升高，壓力越大，溫度越高。
外鍋壁上還裝有排氣閥、溫度計、壓力表及安全閥。排氣閥用于排出空氣；壓力表：以表示鍋內壓力及溫度（公制壓力單位為公斤/cm2、英制壓力單位磅/英寸2、溫度單位℃）；安全閥又稱保險閥，利用可調彈簧控制活塞，超過定額壓力即自行放汽減壓，以保證在滅菌工作中的安全^[1]。
    2.內鍋：為放置滅菌物的空間。空間大約為0.5平方米
3.管路系統：管路系統由安全閥,真空閥、氣動閥等和鍋體組成,整體耐壓為6巴。（水壓試驗為8巴）。
4.自動控制系統：
本機裝有英G公司制造的組合式溫度壓力自動控制記錄儀實施滅菌過程的溫度壓力和時間的預先調節控制和有關參數的記錄。
5.手動控制系統:                                                                 本機還有手動控制系統。手動控制是通過手動閥門來調節兩鍋的溫度和壓力的。同樣有下水、升溫、保溫、上水、冷卻五個階段,其程序過程與自動控制相同。整個程序的溫度、壓力和時間參數仍可由組合式溫度壓力自動控制記錄儀予以記錄。
 
工作原理
高壓蒸氣滅菌方法的原理是水在大氣中100℃左右沸騰，水蒸氣壓力增加，沸騰時溫度將隨之增加，因此，在密閉的高壓蒸氣滅菌器內，當壓力表指示蒸氣壓力增加到15磅(1.05kg/cm)時，溫度則相當于121.3，在這種溫度下20min即可完全殺死細菌的繁殖體及芽胞。
熱力滅菌是應用**早、效果**可靠、使用**廣泛的一種物理滅菌方法,熱力對細胞壁和細胞膜的損傷以及對核酸的作用,均可導致微生物的死亡,而濕熱主要是使微生物蛋白質發生凝固而導致其死亡。壓力蒸汽滅菌器就是利用濕熱殺滅微生物的原理而設計的。采用濕熱滅菌方法的優點在于蒸汽有較強的殺菌作用,它可以使菌體蛋白質含水量增加,使其容易因受熱而凝固,加速微生物的死亡過程^[2]。
 
使用方法
 1工作環境
 環境要求通風、寬敞、地面平整、干凈、整潔，不能與有腐蝕性物品擺放在同一空間。
  2.人員要求
操作人員應穿工作服，使用時不得擅離工作崗位。
  3.操作步驟
     ①開蓋：向左轉動手輪數圈，直**轉動到頂，使鍋蓋充分提起，拉起左立柱上的保險銷，向右推開橫梁移開鍋蓋。
     ②通電：接通電源，此時欠壓蜂鳴器響，顯示本機鍋內無壓力（當鍋內壓力升**約0.03Mpa時蜂鳴器自動關閉），控制面板上的低水位燈亮，鍋內屬斷水狀態。
     ③加水：將純水或生活用水直接注入蒸發鍋內約8升，同時觀察控制面板上的水位燈，當加水**低水位燈滅，高水位燈亮時停止加水。當加水過多發現內膽有存水，開啟下排汽閥放去內膽中的多余水量。
     ④放樣：將培養基堆放在滅菌筐內，各包之間留有間隙，有利于蒸氣的穿透，提高滅菌效果。密封：把橫梁推向左立柱內，橫梁必須全部推入立柱槽內，手動保險銷自動下落鎖住橫梁，旋緊鍋蓋。
     ⑤設定溫度和時間：按一下確認鍵，進入溫度設定狀態，按上下鍵可以調節溫度值，再次按下確認鍵，進入時間設定狀態，按左鍵或上下鍵設置需要的時間，再次按動確認鍵，設定完成，儀器進入工作狀態，開始加熱升溫。
     ⑥滅菌結束后，關閉電源，待壓力表指針回落零位后，開啟安全閥或排汽排水總閥，放凈滅菌室內余氣。若滅菌后需迅速干燥，須打開安全閥或排汽排水總閥，讓滅菌器內的蒸汽迅速排出，使物品上殘留水蒸氣快速揮發。滅菌液體時嚴禁使用干燥方法。#p#分頁標題#e#
⑦啟蓋：同**步。向左轉動手輪數圈，直**轉動到頂，使鍋蓋充分提起，拉起左立柱上的保險銷，向右推開橫梁移開鍋蓋^[3]。
**后，取出培養基，則取出的培養基達到了滅菌的標準。
 
注意事項
①堆放培養基時應注意安全閥放汽孔位置必須留出空氣，保障其暢通，否則易造成鍋體爆裂事故。
②滅菌液體時，應將液體灌裝在耐熱玻璃瓶中，以不超過3/4體積為好，瓶口選用棉花紗塞。
③本器盡量使用純水，以防產生水垢^[4]。
對于許多運用高壓蒸汽滅菌鍋消毒的物體，不僅僅是玻璃器皿，還有無菌包及布類等等物體，因此，需要特別注意。
    **，無菌包不宜過大(小于50cm×30cm×30cm)，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹中央。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒滅菌完畢，關閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態。
　　第二，布類物品應放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進入包裹中央，嚴重影響滅菌效果^[5]。
第三，定期檢查滅菌效果。經高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1周為宜。
 
高壓蒸汽滅菌效果的監測：
   對滅菌效果的檢測有以下三種方法：
   一種是工藝監測，又稱程序監測。根據安裝在滅菌器上的量器（壓力表、溫度表、計時表)、圖表、指示針、報警器等，指示滅菌設備工作正常與否。此法能迅速指出滅菌器的故障，但不能確定待滅菌物品是否達到滅菌要求。此法作為常規監測方法，每次滅菌均應進行檢測。
另一種是化學指示監測。利用化學指示劑在一定溫度與作用時間條件下受熱變色或變形的特點，以判斷是否達到滅菌所需參數^[6]。
還有一種是生物指示劑監測。利用耐熱的非致病性細菌芽胞作指示菌，以測定熱力滅菌的效果。菌種用嗜熱脂肪桿菌，生物指示劑有芽胞懸液、芽胞菌片以及菌片與培養基混裝的指示管。檢測時應使用標準試驗包，每個包中心部位置生物指示劑2個，放在滅菌柜室的上、中層的中央各一個點，下層的前、中、后各一個點。滅菌后，取出生物指示劑，接種于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養基中，置55-60℃溫箱中培養48小時**7天，觀察**終結果。若培養后顏色未變，澄清透明，說明芽胞已被殺滅。達到了滅菌要求。若變為黃色混濁，說芽胞未被殺滅，滅菌失敗^[7]。
 
結論：
通過使用高壓蒸汽滅菌鍋對培養基進行滅菌，并且可以檢測滅菌效果是否達到要求。因此，我們可以得到經過滅菌了的符合要求的培養基。